人肝星形細胞*培養(yǎng)基說明書細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
人肝星形細胞*培養(yǎng)基說明書細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
 
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人肝星形細胞*培養(yǎng)基說明書根瘤菌酒假絲酵母 Candida kefyr

羊IgG蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis

糖細黃鏈霉菌 Streptomyces microflavus珊瑚色諾卡氏菌 Nocardia corallina

NCI-H295R(人腎上腺皮質(zhì)腺細胞)大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

嬰兒雙歧桿菌 Bifidobacterium infantis宇佐美曲霉變種 Aspergillus usamii var.

小鼠肝動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基293E(人胚腎細胞（EBNA1基因修飾）)

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae植物桿菌 Lactobacillus plantarum

小鼠皮膚成纖維樣細胞豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

香菇 Lentinula edodes葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum

人牙周膜成纖維細胞*培養(yǎng)基蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis

瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

大鼠食管上皮細胞*培養(yǎng)基小鼠艾氏腹水細胞

異常漢遜酵母 Hansenula anomala傘枝犁霉 Absidia corymbifera
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