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兔核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒操作步驟：
1．試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。 
2．實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。 
3．不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。 
4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。 
5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。 
6．洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。 
7．底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。 
8．加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。 
9．按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

兔核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒注意事項：
1.不同的試劑盒因工藝和操作方法略有不同，務必按照所用試劑盒嚴格操作，否則容易產(chǎn)生檢測結果的不確定性。
2.若不同批號人ELISA試劑盒的不同組分(A液或酶工作液)，或不同試劑的不同組分進行交叉使用，有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高，花板等情形。
3.反應時間的誤差，做大量標本時，*孔和zui后一孔以及一些特殊標本可能影響較大。
4.臨界值附近標本波動為正?，F(xiàn)象，任何試劑均不可避免。可以考慮將標本做奇數(shù)次復檢。
5.加樣時樣品量誤差，對于陰或很陽的標本影響不大，但對閾值附近的標本影響極大，建議校對加樣器。